細菌總數

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更新時間: 2013-10-12

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水質參數之一,單位體積水中的細菌總量。其檢驗方法是:在玻璃平皿內,接種一毫升水樣或稀釋水樣於加熱液化的營養瓊脂培養基中,冷卻凝固后在37.C培養24小時,培養基上的菌落數或乘以水樣的稀釋倍數即為細菌總數。有的國家把培養溫度定為35°C或其他溫度它們生存在溫血動物的腸道中,故糞便中大量存在。水體中發現這類細菌,可以認為已受到糞便的污染。致病性腸道細菌有沙門氏桿菌(傷寒和副傷寒菌)、志賀氏菌(痢疾菌)和霍亂弧菌等。

細菌總數 -簡介
細菌總數檢驗程序細菌總數檢驗程序

水質參數之一,單位體積水中的細菌總量。其檢驗方法是:在玻璃平皿內,接種一毫升水樣或稀釋水樣於加熱液化的營養瓊脂培養基中,冷卻凝固后在37°C培養24小時,培養基上的菌落數或乘以水樣的稀釋倍數即為細菌總數。有的國家把培養溫度定為35°C或其他溫度,也有把培養時間定為48小時的。 


細菌總數 -分類

水中通常存在的細菌大致可分為三類

①天然水中存在的細菌。普通的是熒光假單孢桿菌、綠膿桿菌,一般認為這類細菌對健康人體是非致病的。

②土壤細菌。當洪水時期或大雨後地表水中較多。它們在水中生存的時間不長,在水處理過程中容易被去除。腐蝕水管的鐵細菌和硫細菌也屬此類。

③腸道細菌。它們生存在溫血動物的腸道中,故糞便中大量存在。水體中發現這類細菌,可以認為已受到糞便的污染。致病性腸道細菌有沙門氏桿菌(傷寒和副傷寒菌)、志賀氏菌(痢疾菌)和霍亂弧菌等。

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細菌總數 -測定

一、 測定方法 平皿計數法

二、 方法依據 《生活飲用水衛生規範》

三、 測定範圍 生活飲用水及其水源水中的細菌總數的測定

四、 測定原理

細菌總數是指水樣在一定條件下培養后(培養基成分,培養溫度和時間、pH、需氧性質等)所得1mL水樣所含菌落的總數。按本作業指導書所得結果只包括一群能在營養瓊脂上發育的嗜中溫的需氧的細菌菌落總數。

五、 試劑

細菌總數 -營養瓊脂
報告報告

1、成分

A蛋白腖 10g 

B牛肉膏 3g

C氯化鈉 5g

D瓊脂 10~20g

E蒸餾水 1000mL

2、製法:將上述成分混合后,加熱溶解,調整pH為7.4~7.6,分裝於玻璃容器中(如用國產含雜質較多的瓊脂時,應先過濾),經121℃滅菌20min,儲存於冷暗處備用。

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六、 儀器設備

1、 高壓蒸汽滅菌器

2、 乾熱滅菌箱

3、 培養箱36±1℃

4、 電爐

5、 天平

6、 冰箱

7、 放大鏡或菌落計數器

8、 pH計或精密ph試紙

9、 滅菌試管、平皿(直徑9cm)、刻度吸管、採樣瓶等

七、 分析步驟

1、生活飲用水

1.1以無菌操作方法用滅菌吸管吸取1mL充分混勻的水樣,注入滅菌平皿中,傾注約15mL已融化並冷卻到45℃左右的營養瓊脂培養基,並立即旋搖平皿,使水樣與培養基充分混勻。每次檢驗時應做一平行接種,同時另用一個平皿只傾注營養瓊脂培養基作為空白對照。

1.2待冷卻凝固后,翻轉平皿,使底面向上,置於36±1℃培養箱內培養24h,進行菌落計數,即為水樣1mL中的細菌總數。

2、水源水

2.1以無菌操作方法吸取1mL充分混勻的水樣,注入盛有9mL滅菌生理鹽水的試管中,混勻成1:10稀釋液。

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2.2吸取1:10的稀釋液1mL注入盛有9mL滅菌生理鹽水的試管中,混勻成1:100稀釋液。按同法依次稀釋成

1:1000,1:10000稀釋液等備用。如此遞增稀釋一次,必須更換一支1 mL滅菌吸管。

2.3用滅菌吸管取2~3個適宜稀釋度的水樣1mL,分別注入滅菌平皿內。以下操作同生活飲用水的檢驗步驟。

八、計算

1、菌落計數及報告方法

作平皿菌落計數時,可用眼睛直接觀察,必要時用放大鏡檢查,以防遺漏。在記下各平皿的菌落數后,應求出同稀釋度的平均菌落數,供下一步計算時應用。在求同稀釋度的平均數時,若其中一個平皿有較大片狀菌落生長時,則不宜採用,而應以無片狀菌落生長的平皿作為該稀釋度的平均菌落數。若片狀菌落不到平皿的一半,而其餘一半中菌落數分佈又很均勻,則可將此半皿計數后乘2以代表全皿菌落數。然後再求該稀釋度的平均菌落數。

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2、不同稀釋度的選擇及報告方法

1)首先選擇平均菌落數在30~300之間者進行計算,若只有一個稀釋度的平均菌落數符合此範圍時,則將該菌落數乘以稀釋倍數報告之(見實例1)

2)若有兩個稀釋度,其生長的菌落數均在30~300之間,則視二者之比值來決定,若其比值小於2應報告兩者的平均數(如實例2)若大於2則報告其中稀釋度較小的(菌落總數如實3)。若等於2亦報告其中稀釋度較小的菌落數(見實例4)。

3)若所有稀釋度的平均菌落數均大於300,則應按稀釋度最高的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之(見實例5)。

4)若所有稀釋度的平均菌落數均小於30,則應以按稀釋度最低的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之(見實例6)。

5)若所有稀釋度的平均菌落數均不在30~300之間,則應以最接近30或300的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之,(見實例7)。

6)若所有稀釋度的均無菌落生長,則以<1乘以稀釋倍數報告之。

7)菌落計數的報告:菌落數在100以內時按實有數報告,大於100時,採用二位有效數字,在二位有效數字後面的數值,以四捨五入方法計算,為了縮短數字後面的零數也可用10的指數來表示。

細菌總數 -生活飲用水水質標準規定

1976年中國頒布的生活飲用水水質標準規定每毫升水的細菌總數不得超過100個。

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